GLACIOS 200kV : Caméra Falcon 4i + Filtre d’Energie Selectris X

MET Glacios au labo AFMB

Structure de l’apoferritine à 1.9Å résolue lors de la procedure CWAT Brno en 2023
Element de l’hélice alpha de l’apoferritine

Le domaine de la cryo-microscopie électronique a connu une évolution remarquable et continue à se developer très rapidement. Grace aux avancés technologiques récents, l’efficacité d’utilisation des microscopes à transmission modernes (MET) a beaucoup augmenté. Des systèmes robotiques, des détecteurs très performants et des éléments optiques améliorés ont transformé notre mode de travail en microscopie électronique. Dorénavant, il est possible de tester un grand nombre des conditions (des grilles congelées) en très peu de temps, collecter des données sur des grilles multiples et utiliser des logiciels avec des capacités IA intégrées.

AFMB s’est équipé récemment du nouveau MET Glacios 200kV permettant le criblage rapide des échantillons en conditions cryo et la collection des données à haute résolution. Le microscope sera disponible aux utilisateurs à partir du mois d’avril 2024. La configuration moderne de notre Glacios assure la plus haute performance possible pour un instrument de 200kV. La combinaison du détecteur d’électrons direct de dernière génération Falcon4i avec le filtre d’énergie Selectris X disponibles sur notre MET resulte en qualité supérieure des images et la rapidité d’acquisition imbattables (>6K images/ 12h de collecte en mode counting).

Des tests de performance de notre appareil conduits à l’usine Thermofisher pendent la procédure d’acceptation CWAT ont démontré que la résolution supérieure à 1.9A peut etre atteinte sur un échantillon d’apoferritine. La plupart des experiences sur MET Glacios seront effectutuées sur des echantillons des particules isolées. Cependent ce microscope peut être utilisé pour des collections des données préliminaires en cryo-tomographie électronique sous conditions de l’épaisseur d’échantillons suffisamment fine (<150nm) tels que lamella ou bien des particules purifiées (échantillons des vésicules inclus).

Tous les utilisateurs des laboratoires de recherche des sciences du vivant sont bienvenus sur notre plateforme. Des utilisateurs peuvent beneficier d’accès au laboratoire de préparation des échantillons en cas de besoin. Pour congélation des échantillons nous proposons deux systèmes : Vitrobot Mark4 (avril 2024) et Leica GP avec une perspective d’installation de Vitrobot Mark5 prévu pour la fin de 2024.

Des formations “sur mesure” sont possible sur demande pour des utilisateurs avec un niveau en microscopie électronique avancé.

En complément de notre MET Glacios nous proposons un deuxième microscope électronique Tecnai 120 que nous recommandons fortement pour des projets dans leur phase initiale pour tester des échantillons.

En 2024 nous n’avons pas de procédure de sélection des projets pour Glacios, réservation est obligatoire par le responsable de la plateforme. Nous vous invitons à prendre contact avec nous pour établir des meilleures conditions de travail.

Publications citant ce service

    • Nilsson J, Baroudi H, Gondelaud F, Pesce G, Bignon C, Ptchelkine D, Chamiech J, Cottet Hervé, Kajava A, Longhi S (2023) Molecular Determinants of Fibrillation in a Viral Amyloidogenic Domain from Combined Biochemical and Biophysical Studies. Int J Mol Sci 24:399

    • Pesce G, Gondelaud F, Ptchelkine D, Nilsson J, Bignon C, Cartalas J, Fourquet P, Longhi S (2022) Experimental Evidence of Intrinsic Disorder and Amyloid Formation by the Henipavirus W Proteins Int J Mol Sci 23:923

    • Gondelaud F, Pesce G, Nilsson J, Bignon C, Ptchelkine D, Gerlier D, Mathieu C, Longhi S (2022) Functional benefit of structural disorder for the replication of measles, Nipah and Hendra viruses. Essays in Bioc 66:915-934

    • Bebeacua C, Tremblay D, Farenc C, Chapot-Chartier MP, Sadovskaya I, van Heel M, Veesler D, Moineau S, Cambillau C (2013) Structure, adsorption to host, and infection mechanism of virulent lactococcal phage p2. J Virol 87:12302-12.

    • Desmyter A, Farenc C, Mahony J, Spinelli S, Bebeacua C, Blangy S, Veesler D, van Sinderen D, Cambillau C (2013) Viral infection modulation and neutralization by camelid nanobodies. Proc Natl Acad Sci U S A 110:E1371-9.

    • Sciara G, Bebeacua C, Bron P, Tremblay D, Ortiz-Lombardia M, Lichière J, van Heel M, Campanacci V, Moineau S, Cambillau C (2010) Structure of lactococcal phage p2 baseplate and its mechanism of activation. Proc Natl Acad Sci USA 10:6852-7.

    • Bignon C, Li C, Lichière J, Canard B, Coutard B (2013) Improving the soluble expression of recombinant proteins by randomly shuffling 5’ and 3’ coding-sequence ends. Acta Crystallogr D 69, 2580-2.

    • Le Breton M, Meyniel-Schicklin L, Deloire A, Coutard B, Canard B, de Lamballerie X, Andre P, Rabourdin-Combe C, Lotteau V, Davoust N (2011) Flavivirus NS3 and NS5 proteins interaction network : a high-throughput yeast two-hybrid screen. BMC Microbiol 11, 234.