CNRS - AIX MARSEILLE UNIV : UMR7257

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Biologie Structurale

Production de protéines recombinantes en systèmes eucaryotes

Responsable Claire DEBARNOT

Ce service offre les technologies les plus récentes pour la production de protéines recombinantes solubles à partir de cellules de mammifère (HEK293, CHO, COS-7) ou d’insecte (S2, Sf9) assurant la plupart des modifications post-traductionnelles (ponts disulfure, N- et O-glycosylation, phosphorylation, etc) susceptibles d’être importantes pour la structure ou la fonction des protéines produites. L’étude de faisabilité associe le cahier des charges de la demande (quantité de protéine et fréquence requises, étiquettes de purification et détection choisies, etc) et l’expertise du personnel dédié à la plateforme. Le protocole de production optimisé est évalué puis, si validé, amplifié pour une analyse de production quantitative. Les utilisateurs assurent eux-mêmes les étapes de purification et caractérisation des protéines produites.

Accessibilité

Académiques et industriels

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Equipement spécifique

  • 4 incubateurs à CO2
  • 3 armoires thermorégulatrices
  • 4 PSMII
  • 1 microscope à fluorescence
  • 1 microscope inversé

Coût

  • Phase 1 (évaluation) : dépendant du système d’expression utilisé
  • Phase 2 (production) : dépendant des quantités souhaitées et
    des taux d’expression obtenus en phase 1

Publications en lien avec les technologies utilisées

  • Durocher Y, Loignon M, Process, vectors and engineered cell lines for enhanced large-scale transfection, National Research Council of Canada, WO2009/137911.
  • Aricescu AR, Lu W, Jones EY (2006) A time- and cost-efficient system for high-level protein production in mammalian cells. Acta Cryst D62, 1243–1250.
  • Yao F, Svensjö T, Winkler T, Lu M, Eriksson C, Eriksson E (1998) Tetracycline repressor, tetR, rather than the tetR-mammalian cell transcription factor fusion derivatives, regulates inducible gene expression in mammalian cells. Hum Gene Ther 9, 1939-1950.
  • Liepman AH, Wilkerson CG, Keegstra K (2005) Expression of cellulose synthase-like (Csl) genes in insect cells reveals that CslA family members encode mannan synthases. Proc Natl Acad Sci USA 102:2221-2226.
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